肿瘤细胞系异种移植模型
主要运用于大规模药效初筛、肿瘤生长和转移的基础生物学研究
主要运用于大规模药效初筛、肿瘤生长和转移的基础生物学研究
肿瘤细胞系异种移植模型
1.实验原理:
R-NSG小鼠极度的免疫缺陷使其无法识别和排斥外来的人源肿瘤细胞,为肿瘤细胞的定植和生长提供了近乎“无障碍”的环境。
2.实验方法
将体外培养的人源肿瘤细胞系(如A549肺癌细胞、MCF-7乳腺癌细胞等)通过皮下、尾静脉或原位注射的方式植入NSG小鼠。
3.实验流程:
①肿瘤细胞准备:体外培养并收集对数生长期的肿瘤细胞,重悬于PBS或基质胶中;
②NSG小鼠准备:选择6-8周龄NSG小鼠,必须在SPF级屏障设施中饲养,提供无菌免疫缺陷饲料和无菌水。
③肿瘤细胞接种:
a.皮下注射:小鼠背部侧方或肩胛骨区域的皮下,此方法最常用,易于监测肿瘤体积。
b.原位注射:将细胞注射到肿瘤原发器官(如肝脏、乳腺脂肪垫),能更好地模拟肿瘤微环境。
c.尾静脉注射:用于建立肿瘤转移模型。需通过活体成像(如生物发光)或终点组织学分析来评估转移灶。
④肿瘤监测:
a.肿瘤监测:从接种后约一周开始,每周2-3次用游标卡尺测量皮下肿瘤的长径;
b.小鼠健康监测:每日观察小鼠的精神状态、活动性、毛发和体重。体重下降超过20%是重要的痛苦指标;
c.药物干预:当肿瘤体积达到预设值(如100 mm³)时,开始分组给药(对照、治疗组),并持续监测肿瘤生长曲线。
⑤终点分析与样本收集