技术原理

   CRISPR/Cas9（Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats）是最新出现的一种由sgRNA指导Cas核酸酶对靶向基因进行特定DNA修饰的技术。在这一系统中，sgRNA引导序列靶定位点剪切双链DNA达到对基因组DNA 进行修饰的目的。CRISPR/Cas9系统能够对小鼠基因组特定基因位点进行精确编辑，目前瑞思元已经成功将此技术应用于小鼠基因敲除/敲入模型制备，以及条件性敲除（Loxp系统）模型制备。      

      目前瑞思元采取优化过的野生型Cas9和双切口Cas9n（Optimized Cas9 System,OCAS and OCASn）。采用优化过的双切口Cas9n(OCASn)可以将脱靶效应降到最低。

条件性基因敲除小鼠

      应用sgRNA-Cas9和donor的方法将loxP敲入到目的基因两侧，依赖于Cre酶进行条件敲除。

运用

    研究完全性敲除后致死性目的基因的生理或病理功能；

   研究目的基因在特定组织或细胞中的功能；

    研究目的基因在特定时期或特定阶段发挥的作用；

技术优势

   研发周期短（4-6个月），同源重组效率高；

    打破对小鼠遗传品系的限制，可以实现不同遗传背景或在已有基因修饰小鼠模型基础上进行基因编辑；

制备流程

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